PCR反應試劑盒 ( 2000bp )
貨號:RTC3105
● 簡(jiǎn)介:
本試劑盒包含完成PCR反應所需全部試劑,可進(jìn)行PCR實(shí)驗的教學(xué)和科研。其中模板為質(zhì)粒DNA;引物為根據質(zhì)粒DNA序列設計的上、下游引物;2×Taq
PCR MasterMix包含Taq DNA聚合酶、dNTPs、MgCl2、反應緩沖液、PCR反應的增強劑和優(yōu)化劑以及穩定劑。使用時(shí),只需補加實(shí)驗所需的引物和模板后即可進(jìn)行PCR反應,可最大限度的減少人為誤差,具有快速簡(jiǎn)便、穩定性好等優(yōu)點(diǎn)。使用本試劑盒進(jìn)行PCR反應后,PCR產(chǎn)物大小應為2000bp。
● 貯存:-20℃。有效期一年。
● 包裝:20次
● 試劑盒組成:
組成
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濃度
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體積
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模板
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10
ng/μl
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30
μl
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上游引物(2000
FW)
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10
μM
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30
μl
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下游引物(2000
RV)
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10
μM
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30
μl
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2×Taq
PCR MasterMix(含染料)
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-
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2×500
μl
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去離子水
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-
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1
ml
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● 實(shí)驗步驟:
1.
冰浴中徹底融化模板,引物和2×Taq
PCR MasterMix,混勻后快甩離心將溶液收集到管底。
2.
按照下表在0.2ml
PCR管中制備反應體系:
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50μl反應體系
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上游引物(2000FW) 10μM
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1 μl
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下游引物(2000RV) 10μM
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1 μl
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模板
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1 μl
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2×Taq
PCR MasterMix
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25 μl
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水
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22 μl
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3.
快甩離心將反應液收集到管底。
4.
PCR儀如果沒(méi)有熱蓋加熱的話(huà),補加25μl礦物油。
5.
PCR儀上執行以下程序:
步驟
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溫度
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時(shí)間
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循環(huán)數
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初始變性
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94℃
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5 min
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1
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變性
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94℃
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30 sec
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30
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退火
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54℃
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30 sec
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延伸
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72℃
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2 min
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最后延伸
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72℃
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5 min
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1
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6. 反應完成后,取5ml反應液,1%瓊脂糖凝膠電泳,觀(guān)察條帶情況。